北京中檢葆泰生物技術有限公司

2022年4月22日，《乳中乳過氧化物酶活性的測定 . 比色法》團體標準由中國食品科學技術學會發布，并正式實施。該標準由光明乳業股份有限公司、上海市農產品質量安全中心、北京中檢葆泰生物技術有限公司和內蒙古伊利實業集團股份有限公司共同起草。

標準采用比色法檢測乳中乳過氧化物酶的活性，乳中乳過氧化物酶與底物3,3' ,5,5'-四甲基聯苯胺(TMB)發生氧化反應,生成藍色產物,加酸終止反應后溶液變成黃色。在450 nm下測定溶液的吸光度,乳過氧化物酶的活性與吸光度成正比,通過標準曲線定量計算其酶活性。

試劑和材料

乳過氧化物酶活性試劑，或Evergreen乳過氧化物酶活性試劑盒。注：Evergreen乳過氧化物酶活性試劑盒由北京中檢葆泰生物技術有限公司提供。

樣品提取

吸取10.00 mL樣品，置于15 mL離心管中，加入0.6 mL樣品處理溶液，渦旋混勻，靜置5~10 min，3000g離心10 min，用濾紙過濾，收集濾液待測。

測定

取出所需數量的微孔板，并做好標記。吸取50 μL濾液和系列標準溶液分別加至微孔中，加入50 μL乳過氧化物酶底物溶液（TMB），吹打混勻，室溫避光孵育15 min。孵育結束后，向每個微孔中加入100μL終止液，吹打混勻后，立即用酶標儀在450nm下讀取并記錄每個微孔的 OD值。